Статистика

Объем пробы.

Объем пробы является третьим по значению параметром, влияющим на ширину хроматографических пиков. Первыми, без сомнения, являются удерживаемый объем и число теоретических тарелок. Проба влияет на ширину пика не только своей величиной, но и видом своего концентрационного профиля. Опыт показывает, что в зависимости от конструкции устройства ввода пробы, проба претерпевает изменения до того, как она достигнет сорбента. Изменения состоят в том, что концентрация вещества в разных местах будет неодинакова, т. е. концентрационный профиль может существенно отличаться от прямоугольной формы. Скорее всего, профиль может иметь вид кривой Гаусса.

Рассмотрим на примере этих 2-х случаев вклад пробы в ширину хроматографического пика. Для прямоугольного концентрационного профиля вклад объема пробы выражается следующей формулой:

σ = σo [ 0,257 (Vin / σo)2 +1],

(2)

где

σ - ширина пика на расстоянии полувысоты от основания пика;

σo - ширина пика при исчезающе малом объеме пробы;

Vin - объем пробы.

Это формула верна при 0<= Vin/ σo <= 2.

Если концентрационный профиль пробы представляет собой кривую Гаусса, то ширина пика равна

σ2 = σo2 + σin2,

(3)

где

σin - ширина кривой концентрационного профиля.

Сравнение этих 2-х формул показывает, что при небольших величинах объема пробы ход закономерности фактически идентичен. Можно сказать, что

σin = 0,7 Vin.

(4)

Отсюда следует, что при небольших объемах пробы нет большой необходимости в выяснении вида концентрационного профиля.